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做ELISA標準曲線時需要注意的細節問題
點擊次數:1157 發布時間:2016-03-22
 

做ELISA標準曲線時需要注意的細節問題 

用于免疫檢測的所謂“標準曲線"其實稱為擬合曲線比較合適。ELISA標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚是關系到實驗的成敗。我司技術員為您總結出:做ELISA標準曲線時需要重點注意的細節問題,一起來看下。

 
    1.設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
 
    2.檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
 
    3.標準曲線的樣品數一般為7個點,但少要保證有5個點。
 
    4.做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R少要大于0.98,對于有些實驗,少要0.99甚是0.999。
 
    5.樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
 
    6.好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離
 
 
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